Kromasil液相色譜柱是高效液相色譜儀最主要的部件,被測物質能否被很好的分離和測定,色譜柱的性能起著決定性的作用,因此,應特別注意色譜柱的活化環(huán)節(jié),此外色譜柱的日常維護也很重要,有效地維護可以延長色譜柱的使用壽命。
Kromasil液相色譜柱由柱管、壓帽、卡套(密封環(huán))、篩板(濾片)、接頭、螺絲等組成。柱管多用不銹鋼制成,壓力不高于時,也可采用厚壁玻璃或石英管,管內壁要求有很高的光潔度。為提高柱效,減小管壁效應,不銹鋼柱內壁多經(jīng)過拋光。也有人在不銹鋼柱內壁涂敷氟塑料以提高內壁的光潔度,其效果與拋光相同還有使用熔融硅或玻璃襯里的,用于細管柱。色譜柱兩端的柱接頭內裝有篩板,是燒結不銹鋼或鈦合金,取決于填料粒度,目的是防止填料漏出,柱內徑一般是根據(jù)柱長、填料粒徑和折合流速來確定,目的是為了避免管壁效應。
Kromasil液相色譜柱的選擇至少要認準這3點
1.填料基質
1.1.硅膠基質:純度高本錢低,強度大,化學修飾輕易,但pH值范圍有限。大多硅膠基質填料在pH2-8之間穩(wěn)定,但經(jīng)過特殊修飾的硅膠鍵合相可以穩(wěn)定在pH1.5-10。
1.2.聚合物基質:應用pH值范圍寬,溫度穩(wěn)定(高溫可以達到80度以上),機械強度小。
2.含碳量
含碳量指的是硅膠表面鍵合相的比例,與比表面積和鍵合覆蓋度等有關。高含碳量進步柱容量、分辨率及分析時間,用于要求高分離度的復雜樣品;低含碳量分析時間短、展現(xiàn)不同的選擇性,用于快速分析簡單樣品及需要高含水活動相條件的樣品。一般C18的含碳量在7-19%不等。
3.孔徑和比表面積是相輔相成的兩個概念??讖叫”缺砻娣e大,反之亦然。比表面積大,增加樣品與鍵合相之間的反應,增加保存,上樣量和復雜成分的分離度;比表面積小,平衡時間快,適合梯度分析。